Liver structural injury in leptin-deficient (ob/ob) mice: lipogenesis, fibrogenesis, inflammation, and apoptosis / Lesión estructural del hígado en ratones con deficiencia de leptina (ob/ob): lipogénesis, fibrogénesis, inflamación y apoptosis

SUMMARY: Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) might progress the steatosis to nonalcoholic steatohepatitis (NASH), reaching a cirrhosis state and possibly hepatocellular carcinoma. The liver of three-month-old C57BL/6J mice (wild-type, WT group, n=10) and leptin- deficient obese mice (ob/ob group, n=10) were studied, focusing on the mechanisms associated with the activation of the hepatic stellate cells (HSCs) and pro-fibrogenesis. The obese ob/ob animals' liver showed steatosis, increased lipogenesis gene expressions, inflammation, increased pro-inflammatory gene expressions, inflammatory infiltrate, and potential apoptosis linked to a high Caspase 3 expression. In ob/ob mice, liver sections were labeled in the fibrotic zones by anti-alpha-smooth muscle actin (alpha-SMA) and anti-Reelin, but not in the WT mice. Moreover, the alpha-SMA gene expression was higher in the ob/ob group's liver than the WT group. The pro-fibrogenic gene expressions were parallel to anti- alpha-SMA and anti-Reelin immunofluorescence, suggesting HSCs activation. In the ob/ob animals, there were increased gene expressions involved with lipogenesis (Peroxisome proliferator-activated receptor-gamma, Cell death-inducing DFFA-like effector-c, Sterol regulatory element-binding protein-1c, and Fatty acid synthase), pro-fibrogenesis (Transforming growth factor beta1, Smad proteins- 3, Yes-associated protein-1, Protein platelet-derived growth factor receptor beta), pro-inflammation (Tumor necrosis factor-alpha, and Interleukin-6), and apoptosis (Caspase 3). In conclusion, the results in obese ob/ob animals provide a clue to the events in humans. In a translational view, controlling these targets can help mitigate the hepatic effects of human obesity and NAFLD progression to NASH.

RESUMEN: La enfermedad del hígado graso no alcohólico (HGNA) puede progresar de la esteatosis a esteatohepatitis no alcohólica (ENA), alcanzando un estado de cirrosis y posiblemente carcinoma hepatocelular. Se estudió el hígado de ratones C57BL / 6J de tres meses de edad (tipo salvaje, grupo WT, n = 10) y ratones obesos con deficiencia de leptina (grupo ob/ob, n = 10), centrándose en los mecanismos asociados con la activación de las células estrelladas hepáticas (HSC) y profibrogénesis. El hígado de los animales obesos ob/ob mostró esteatosis, aumento de la expresión génica de la lipogénesis, inflamación, aumento de la expresión génica proinflamatoria, infiltrado inflamatorio y posible apoptosis ligada a una alta expresión de Caspasa 3. En ratones ob/ob, las sec- ciones de hígado se marcaron en las zonas fibróticas con anti-alfa- actina de músculo liso (alfa-SMA) y anti-Reelin, pero no en los ratones WT. Además, la expresión del gen alfa-SMA fue mayor en el hígado del grupo ob/ob que en el grupo WT. Las expresiones génicas profibrogénicas fueron paralelas a la inmunofluorescencia anti-alfa-SMA y anti-Reelin, lo que sugiere la activación de las HSC. En los animales ob/ob, hubo un aumento de las expresiones génicas involucradas con la lipogénesis (receptor activado por proliferador de peroxisoma gamma, efector c similar a DFFA inductor de muerte celular, proteína de unión al elemento regulador de esterol-1c y sintasa de ácidos grasos), pro-fibrogénesis (factor de crecimiento transformante beta 1, proteínas Smad-3, proteína-1 asociada a Yes, receptor beta del factor de crecimiento derivado de plaquetas de proteínas), proinflamación (factor de necrosis tumoral alfa e interleucina-6) y apoptosis (caspasa 3). ). En conclusión, los resultados en animales obesos ob/ob proporcionan una pista de los eventos en humanos. Desde un punto de vista traslacional, el control de estos objetivos puede ayudar a mitigar los efectos hepáticos de la obesidad humana y la progresión de HGNA a ENA.

Hepatic mitochondria in diet-induced obese mice (stereology and molecular analysis) / Mitocondrias hepáticas en ratones obesos inducidos por la dieta (estereología y análisis molecular)

SUMMARY: The world population is going through an obesity epidemic that has severe consequences for the health system. This study focused on studying hepatic mitochondria in obese animals induced by a high-fat (HF) diet and used the model-based stereology in electron micrographs for the quantitative study. Besides, the gene expressions of molecular markers of mitochondrial biogenesis carnitine palmitoyltransferase 1a (Cpt 1α), mitochondrial transcription factor a (Tfam), uncoupling protein 3 (Ucp 3), and nuclear respiratory factor 1 (Nrf 1) were analyzed. The HF diet caused a weight gain of +1820 % comparing the control group (C) with the HF group (from 0.32±0.31 g to 5.5±0.39 g, P<0.001). The HF group showed fat droplets in the hepatocyte cytoplasm (steatosis) and less dense and large mitochondria in transmission electron microscopy. The mitochondria size (cross-section) did not show a significant difference between the groups C and HF. However, the mitochondria numerical density per area was 30 % less, the mitochondrial surface density (outer membrane) was 20 % less, and the mitochondrial volume density was 22 % less in the HF group than the C group. The gene expressions of molecular markers of mitochondrial biogenesis Cpt 1α, Tfam, Ucp 3, and Nrf 1 decreased in the HF group compared to the C group. The quantitative results match perfectly with the molecular ones of mitochondrial biogenesis markers. In the future, it will be crucial to verify if and how these data recover with the reduction of obesity, which would be of significant interest given the current obesity epidemic that affects the world population.

RESUMEN: La población mundial atraviesa una epidemia de obesidad que tiene graves consecuencias para el sistema de salud. Este estudio se centró en el análisis de las mitocondrias hepáticas en animales obesos inducidos por una dieta alta en grasas (HF) y utilizó la estereología basada en modelos en micrografías electrónicas para el estudio cuantitativo. Además, se analizaron las expresiones génicas de los marcadores moleculares de la biogénesis mitocondrial carnitina palmitoiltransferasa 1a (Cpt 1α), factor de transcripción mitocondrial a (Tfam), proteína desacoplante 3 (Ucp 3) y factor respiratorio nuclear 1 (Nrf 1). La dieta HF provocó un aumento de peso de +1820 % comparando el grupo de control (C) con el grupo HF (de 0,32 ± 0,31 g a 5,5 ± 0,39 g, P <0,001). El grupo HF mostró gotas de grasa en el citoplasma de los hepatocitos (esteatosis) y mitocondrias menos densas y grandes en la microscopía electrónica de transmisión. El tamaño de las mitocondrias (sección transversal) no mostró una diferencia significativa entre los grupos C y HF. Sin embargo, la densidad numérica de mitocondrias por área fue 30% menor, la densidad de superficie mitocondrial (membrana externa) fue 20 % menor y la densidad de volumen mitocondrial fue 22 % menor en el grupo HF que en el grupo C. Las expresiones génicas de los marcadores moleculares de la biogénesis mitocondrial Cpt 1α, Tfam, Ucp 3 y Nrf 1 disminuyeron en el grupo HF en comparación con el grupo C. Los resultados cuantitativos coinciden perfectamente con los moleculares de los marcadores de biogénesis mitocondrial. En el futuro, será crucial verificar si estos datos se recuperan y cómo se recuperan con la reducción de la obesidad, lo que sería de gran interés dada la actual epidemia de obesidad que afecta a la población mundial.

Influence of duodenogastric reflux in the gastric mucosa histological changes of rats infected with Helicobacter pylori / Influência do refluxo duodenogástrico nas alterações histológicas da mucosa gástrica de ratos infectados com Helicobacter pylori

ABSTRACT Objective: to evaluate the influence of Duodenal reflux in histological changes of the gastric mucosa of rats infected with Helicobacter pylori submitted to pyloroplasty. Methods: after two weeks of acclimation, we infected 30 male Wistar rats with Helicobacter pylori. We randomly divided them into three groups: one submitted to pyloroplasty, another to partial gastrectomy and the third, only infected, was not operated. After six months of surgery, euthanasia was carried out. Gastric fragments were studied by light microscopy to count the number of H. pylori, and to observe the histological changes (gastritis, metaplasia, dysplasia and neoplasia). We confirmed these changes by immunohistochemistry using the molecular markers PCNA and TGF-beta. Results: the animals submitted to pyloroplasty had higher percentage of colonization by H. pylori (median=58.5; gastrectomy=16.5; control=14.5). There was a positive correlation between the amount of H. pylori and the occurrence of chronic gastritis present in the antral fragments. Neoplasia occurred in 40% of rats from the group submitted to pyloroplasty. The staining with PCNA and TGF-ß confirmed the histopathological changes visualized by optical microscopy. Conclusions: the antral region was the one with the highest concentration of H. pylori, regardless of the group. There was a positive correlation between the appearance of benign disorders (chronic gastritis, metaplasia, dysplasia) and cancer in mice infected with H. pylori submitted to pyloroplasty.

RESUMO Objetivo: avaliar a influência do refluxo duodenogástrico nas alterações histológicas da mucosa gástrica de ratos, infectados por Helicobacter pylori, submetidos à piloroplastia. Método: após duas semanas de aclimatação, 30 ratos machos da raça Wistar, foram infectados com o microorganismo patogênico H. pylori. De forma aleatória, foram divididos em três grupos: um submetido à piloroplastia, outro à gastrectomia parcial e o terceiro, apenas infectados, não foi operado. Após seis meses de operados, procedeu-se a eutanásia. Os fragmentos gástricos foram estudados por microscopia óptica, para a contagem da quantidade de H. pylori, e para a observação das alterações histológicas (gastrite, metaplasia, displasia e neoplasia). A confirmação dessas alterações foi feita por imuno-histoquímica, utilizando os marcadores moleculares PCNA e TGFbeta. Resultados: os animais submetidos à piloroplastia tiveram maior percentual de colonização por H. pylori (mediana=58,5; gastrectomia=16,5; controle=14,5). Houve correlação positiva entre quantidade de H. pylori e ocorrência de gastrite crônica presente nos fragmentos do antro. Ocorreu 40% de neoplasia no grupo submetido à piloroplastia. A marcação de PCNA e TGF-beta confirmou as alterações histopatológicas visibilizadas à microscopia óptica. Conclusões: a região do antro foi a que apresentou a maior concentração de H. pylori, independente do grupo. Houve correlação positiva entre e o aparecimento de alterações benignas (gastrite crônica, metaplasia, displasia), e de neoplasia nos ratos infectados com H. pylori submetidos à piloroplastia.

Peripheral blood fibrocytes: new information to explain the dynamics of Leishmania infection

Fibrocytes are important for understanding the progression of many diseases because they are present in areas where pathogenic lesions are generated. However, the morphology of fibrocytes and their interactions with parasites are poorly understood. In this study, we examined the morphology of peripheral blood fibrocytes and their interactions with Leishmania (L.) amazonensis . Through ultrastructural analysis, we describe the details of fibrocyte morphology and how fibrocytes rapidly internalise Leishmania promastigotes. The parasites differentiated into amastigotes after 2 h in phagolysosomes and the infection was completely resolved after 72 h. Early in the infection, we found increased nitric oxide production and large lysosomes with electron-dense material. These factors may regulate the proliferation and death of the parasites. Because fibrocytes are present at the infection site and are directly involved in developing cutaneous leishmaniasis, they are targets for effective, non-toxic cell-based therapies that control and treat leishmaniasis.

The microfibril-elastin fiber system distribution in left atrioventricular valve of the rat / Distribución del sistema de microfibrillas y fibras de elastina en la valva atrioventricular izquierda de la rata

The microfibril-elastin fiber system, an important constituent of the extracellular matrix, was studied in the rat left atrioventricular valve to investigate the interrelationship of oxytalan, elaunin and elastic fibers in left atrioventricular valve morphology. The elastin fibers forms continuous bundles observed along the length of the valve in atrial and ventricular layers and oriented parallel to endothelium. The elaunin and oxytalan fibers are distributed in the thickest fiber bundles along the length of the valve. The thinner fibers which radiated towards both the atrial and spongiosa layers, either as isolated or arborescent fiber bundles were identified as oxytalan fibers. With transmission electron microscopy elastic fibers were seen mainly in the atrial layer. The spongiosa layer was composed of elaunin and oxytalan fibers and ventricular layer showed elaunin fibers arranged in continuous bundles parallel to the endothelium. Both fibrillin and elastin were seen and identified by immunocytochemistry with colloidal gold in the left atrioventricular valve spongiosa and atrial layers. These observations allow us to suggest that the microfibril-elastin fiber system plays a role in the mechanical protection and maintenance of the integrity of the rat left atrioventricular valve.

Fue estudiado el sistema de fibras microfibrillas-elastina, un componente importante de la matriz extracelular, en la valva atrioventricular izquierda de rata, con la finalidad de investigar la interrelación de oxitalán, elaunin y fibras elásticas en la morfología de dicha valva. Las fibras de elastina forman paquetes continuos a lo largo de la valva en las capas atriales y ventriculares, orientadas paralelamente al endotelio. Las fibras de elaunin y oxitalán se distribuyen en haces de fibras más gruesas a lo largo de la valva. Las fibras más delgadas, las cuales se irradiaban hacia las capas atrial y esponjosa, ya sea como haces de fibras aisladas o arborescentes, fueron identificadas como fibras oxitalán. En la capa atrial a través de microscopía electrónica de transmisión se observaron principalmente fibras elásticas. La capa esponjosa estaba compuesta por fibras de elaunin y oxitalán; la capa ventricular mostró fibras de elaunin dispuestas en haces continuos paralelos al endotelio. Tanto fibrilina y elastina se observaron e identificaron por inmunocitoquímica con oro coloidal en las capas esponjosa y atrial de la valva atrioventricular izquierda. Estas observaciones nos permiten sugerir que el sistema de fibras de elastina-microfibrillas tienen participación en la protección mecánica y la mantención de la integridad de la valva atrioventricular izquierda en la rata.

Uncaria tomentosa extract: evaluation of effects on the in vitro and in vivo labeling of blood constituents with technetium-99m

The influence (in vivo and in vitro) of an Uncaria tomentosa extract (Cats claw) on the labeling of red blood cells (RBCs) and plasma and cellular proteins with technetium-99m (Tc-99m) was evaluated. For the in vivo treatment, animals were treated with Cats claw. For the in vitro treatment, heparinized blood was incubated with Cats claw before the addition of stannous chloride (SnCl2) and Tc-99m. Samples of plasma (P) and RBCs were separated and also precipitated with trichloroacetic acid. The soluble and insoluble fractions of P and RBCs were isolated. The analysis of the results of the in vivo study, indicates that there is no significant alteration on the uptake of Tc-99m by the blood constituents, but it significantly decrease (p<0.05) the labeling of blood constituents by in vitro methods. These effects could be due to chelation of stannous and /or pertechnetate ions and blockage of the Tc-99m bindings sites.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência (in vivo e in vitro) de um extrato de Uncaria tomentosa (unha de gato) na marcação de hemácias e proteínas plasmáticas e celulares com tecnécio-99m (Tc-99m). Para o estudo in vivo, animais foram tratados com um extrato de unha de gato. Para o estudo in vitro, sangue heparinizado foi incubado com o extrato de unha de gato antes da adição de cloreto estanoso (SnCl2) e Tc-99m. Amostras de plasma e células foram separadas e também precipitadas com ácido tricloracético. As frações solúveis e insolúveis foram isoladas. A análise dos resultados do estudo in vivo, indica que não houve alteração significante na captação de Tc-99m pelos constituintes sanguíneos, entretanto, no tratamento in vitro, ocorreu redução significante da marcação de constituintes sanguíneos. Esses efeitos poderiam ser justificados por quelação dos íons estanoso e pertecnetato e bloqueio dos sítios de ligação do Tc-99m.

Experimental models using radionuclides for assessment of the effects of natural drugs

The aim of this study was to evaluate the effect of the extracts of Nectandra membranacea (N. membranacea), Ginkgo biloba (EGb) and Passiflora (PEF) on the morphology of red blood cells (RBC), on the biodistribution of sodium pertechnetate (99mTcO4Na), on the morphology of duodenum and on the labeling of blood constituents (BC, IF-P, IF-BC) with technetium-99m (Tc-99m). Morphometry studies also were performed. The results show that EGb promotes alteration of the labeling of BC, IF-P and IF-BC (p<0.05). The N. membranacea extract does not promote significant alteration of the radiolabeling, and PEF extract alters the IF-P labeling. N. membranacea, EGb and PEF extracts were able to alter the RBC morphology (P<0.05). N. membranacea extract and EGb modifies the biodistribution of the 99mTcO4Na, and EGb influences the morphometry of duodenum isolated from rats (P<0.05).

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de um extrato de Nectandra (N. membranacea), de Ginkgo (EGb) e de Passiflora e. flavicarpa (PEF) na marcação de constituintes sanguíneos (BC, IF-P, IF-BC) com Tc-99m, na morfologia de hemácias (RBC), na biodistribuição do 99mTcO4Na na morfologia do duodeno. Amostras de sangue foram incubadas com os extratos. Tc-99m foi adicionado e as frações do plasma (IF-P) e da célula (IF-BC) foram isoladas. Estudos morfométricos foram realizados. Os resultados mostram que EGb promove alteração na marcação de BC, IF-P e IF-BC. N. membranacea não altera a radiomarcação e PEF altera a marcação de IF-P. O extrato de N. membranacea, EGb e PEF alteraram a morfologia de RBC (p<0.05). Os extratos de N. membranacea e EGb modificam a biodistribuição do 99mTcO4Na, e o EGb influencia a morfometria (p<0.05) do duodeno de ratos.

Ultrastructural analysis of kidney, liver and duodenum isolated from treated rats with Ginkgo Biloba extract and effects of this medicinal plant on the biodistribution of the padiopharmaceutical sodium pertechnetate

Ginkgo biloba extract (EGb) has been used to treat memory and concentration deficits, acts as platelet activatingfactor antagonism and prevents against damages caused by free radicals. EGb is a standardized extract that contains 24% flavonoids and 6% terpenoids. The aim of this work was to evaluate the possible influence of an EGb on the ultrastructure of some organs isolated from rats and on the biodistribution of sodium pertechnetate (99mTcO4Na). The animals were treated with EGb and after six days, received 99mTcO4Na. The organs were isolated and fixed for ultrastructural analysis. The results showed that EGb has modified the ultrastructure of kidney, liver and duodenum and altered the biodistribution of 99mTcO4Na (P<0.05). It is speculated that the substances present in the EGb could act directly or generate metabolites capable to promote changes on the biodistribution of 99mTcO4Na and on the morphology of organs at ultrastructural level.

O extrato de Ginkgo Biloba extract (EGb) tem sido usado para tratar dificuldades de concentração,memória, age como antagonista do fator de ativação de plaquetas e previne contra danos causados por radicais livres. EGb é um extrato padronizado com 24% de flavonóides e 6% de lactonas terpênicas. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de um EGb na ultraestrutura de alguns órgãos isolados de ratos e na biodistribuição do radiofármaco pertecnetato de sódio (99mTcO4Na). Os animais foram tratados com EGb e após 6 dias receberam 99mTcO4Na. Os órgãos foram isolados e a radioatividadedeterminada. Os tecidos foram fixados para microscopia eletrônica. Os resultados mostraram que EGb alterou a ultraestrutura do rim, figado e duodeno e modificou a biodistribuição do99mTcO4Na. Sugerimos que substâncias presentes no EGb poderiam agir diretamente ou gerar metabólitos capazes de promover alterações nabiodistribuição e na morfologia de órgãos em nível ultraestrutural.

Efeitos da sinvastatina na hipertrofia lipídica da medula óssea induzida pelo uso de corticóides em ratos / Effects of simvastatin in steroid-induced bone marrow lipidic hypertrophy in rats

OBJETIVOS: Avaliar o efeito do uso da sinvastatina (SV) sobre a área da medula ocupada por adipócitos (AMOA) na cabeça femoral de ratos com hipertrofia lipídica induzida pelo uso de hidrocortisona (HC). MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos (Rattus norvegicus albinus), machos, da linhagem Wistar, distribuídos em cinco grupos, cada um contendo oito animais, de acordo com a medicação administrada diariamente por 14 dias: HC (25mg), HC (25mg) + SV, HC (1mg), HC (1mg) + SV e soro fisiológico (SF). Foram realizadas dosagens séricas de triglicerídeos (TRI), colesterol total (COL), aspartato aminotransferase (AST) e alanina aminotransferase (ALT), antes e depois do tratamento. A AMOA da cabeça femoral foi determinada por morfometria. RESULTADOS: Os grupos foram semelhantes no início do experimento, com relação aos valores séricos de TRI, COL, AST e ALT. Os animais em que foi administrado HC apresentaram maior AMOA, quando comparados com os que receberam SF (p < 0,0001), e elevação estatisticamente significativa nas dosagens séricas de TRI e COL. A AMOA foi maior nos grupos HC do que nos HC + SV (p < 0,0001). No grupo HC (1mg) + SV, não houve diferença significativa na AMOA, quando comparado com o SF (p = 0,5047), nem nos valores séricos de TRI (p = 0,1907) e COL (p = 0,4480), depois do tratamento. Nos animais que receberam HC (25mg) + SV, houve diferença significativa na AMOA, quando comparados com os do grupo SF (p < 0,0001), e nas medidas séricas de TRI (p = 0,0044) e COL (p = 0,0025), depois do tratamento. Todos os grupos apresentaram elevação dos níveis séricos de AST e ALT. O uso de HC se relacionou à maior área ocupada por adipócitos na medula óssea da cabeça femoral, diretamente proporcional à dose administrada. Esse efeito se reduziu com o uso de sinvastatina. CONCLUSÃO: O efeito da sinvastatina na redução da intensidade do aumento do conteúdo lipídico da medula óssea induzida pelo uso de HC foi significativo, sendo mais consistente no ...

OBJECTIVES: To evaluate the effects of using simvastatin (SV) on the medullary area occupied by adipocytes (MAOA) in the femoral head of rats with lipidic hypertrophy induced by hydrocortisone (HC). METHODS: 40 male Wistar rats (Rattus norvegicus albinos) were distributed into five groups, each group with eight animals, according to the medication given daily during 15 days: HC (25 mg), HC (25 mg) + SB, HC (1 mg), HC (1 mg) + SV, and saline solution (SF). Serum triglyceride (TRI), total cholesterol (COL), aspartate aminotransferase (AST), and alanine aminotransferase (ALT) tests were performed before and after treatment. Femoral head MAOA was determined by morphometry. RESULTS: the groups had similar results of serum values of TRI, COL, AST, and ALT in the beginning of the experiment. The animals that received HC had greater MAOA when compared to those receiving SF (p < 0.0001), with statistically significant increases in the serum TRI and COL readings. MAOA was greater in the groups receiving HC than in the groups receiving JC + SV (p < 0.0001). In the group that received HC (1 mg) + SV, there was no significant difference in MAOA, when compared to the group that received SF (p = 0.5047), nor in the serum values of TRI (p = 0.1907) and COL (p = 0.4480), after the treatment. In the animals that received HC (25 mg) + SV, there was a significant difference in MAOA, when compared to the group that received SF (p < 0.0001), and in the serum readings of TRI (p = 0.0044) and COL (p = 0.0025), after the treatment. All groups presented increased serum levels of AST and ALT. The use of HC was related to a larger area occupied by adipocytes in the medulla of the femoral head, which was directly proportional to the dose given. This effect was reduced with the use of simvastatin. CONCLUSION: The use of simvastatin to reduce the bone medulla lipidic content induced by HC was significant, and more consistent in the group treated with low HC doses.

The ingestión of a Nectandra membran cea extract changes the bioavailability of technetium-99m radiobiocomplex in rat organs

The radiobiocomplexes labeled with technetium-99m (Tc-99m) have been widely used in nuclear medicine in single photon emission computed tomography and in basic research. The aim of this study was to assess the influence of a Nectandra membran cea extract on the bioavailability of the sodium pertechnetate (Na99mTc0(4)) radiobiocomplex in rat organs. The animals were treated with a N. membran cea extract (30 mg/ ml), for 6 days. Na99mTc0(4) was injected, the organs were isolated and weighed, and the radioactivity was determined in each organ ( percentATI/organ). The percentATI/organ was divided by the mass of each organ to calculate the percentATI/g. A significant increase of the percentATI/organ of Na99mTc0(4) was observed in muscle and thyroid as well as in the percentATI/g in the heart, kidney and thyroid. These findings could result from the interaction between components of the plant extract and the radiobiocomplex which may influence the uptake Na99mTc0(4) in rat organs. Therefore, precaution is suggested in the interpretation of nuclear medicine results in patients using this herb.

Estudo da matriz extracelular do ligamento periodontal de ratos submetidos a forças mecânicas / Study of the extracellular matrix in the mechanically stressed periodontal ligament of rats

Quarenta ratos tiveram os incisivos inferiores comprimidos um contra o outro, por 24 horas, para estudar a matriz extracelular do ligamento periodontal em reparação. Retirados os aparelhos, cinco animais foram sacrificados em intervalos de 24 horas. Técnicas imunohistoquímicas foram realizadas em porções das mandíbulas contendo os incisivos. O colágeno tipo III, a laminina e a fibronectina aumentaram progressivamente com o tempo, inserindo-se nos tecidos duros e formando redes no interior do ligamento periodontal, demonstrando que se modificam quando forças mecânicas controladas são aplicadas ao dente

DNA typing from vaginal smear slides in suspected rape cases

Na suspeita de casos de estupro, é necessária a realização de exames para constatar a prática do abuso sexual com penetração. Com esse objetivo, nos serviços de medicina legal, é realizada, entre outros exames, a feitura de esfregaços vaginais com a transferência do material biológico para lâmina. Neste trabalho, são descritos dois casos forenses, elucidados pela tipagem de DNA realizada a partir de células de esfregaço vaginal. Em 1999, duas jovens relataram ao Departamento de Polícia do Rio de Janeiro que haviam sido vítimas de abuso sexual. Um suspeito foi detido e apontado pelas vítimas como o agressor. Apesar das acusações, o suspeito alegou sua inocência. Com objetivo de elucidar os fatos, lâminas de esfregaço vaginal representando as únicas evidências biológicas dos suspeitosos casos de estupro foram enviadas ao Laboratório de Diagnósticos por DNA três meses após o crime. Os protocolos utilizados para recuperação celular e extração de DNA baseiam-se em técnicas preexistentes, porém adaptadas para se obter quantidade de DNA suficiente para realização das análises. A quantidade de células foi suficiente para a utilização da técnica de extração diferencial de DNA e sua tipagem por meio de 9 loci "short tandem repeats" (STR). A análise estatística mostrou ser 3,3 bilhões de vezes mais provável que o relatado suspeito seja o doador das células espermáticas encontradas no material biológico coletado das vítimas que qualquer outro indivíduo na população do Rio de Janeiro.

Estudo das alteraçöes da placa epifisária distal do fêmur do rato após fratura ao nível da diáfise / Study of the alterations in the rat's distal growth plate of the femur after fracture at level of the diaphysis

Foi realizado trabalho experimental com ratos machos da raça Wistar, com quatro semanas de vida, nos quais foi executada uma fratura manual, sob anestesia, ao nível da diáfise do fêmur direito, a fim de estudar as alteraçöes da microestrutura da fise distal e as alteraçöes macroscópicas das peças. Após os animais serem sacrificados em grupos iguais ao final de uma, duas, quatro, seis e oito semanas pós-fratura, estudamos os fêmures controles e os fraturados mediante técnicas histológica e histoquímica, avaliaçäo das dismetrias através da mensuraçäo das peças com paquímetro e estudo radiológico. Os resultados demonstraram que do ponto de vista histológico, nos grupos fraturados na 4( e 6( semanas, ocorreu aumento da afinidade pelo alcian blue na placa epifisária, indicativo de maior produçäo de matriz extracelular nesse período. Em relaçäo à macroscopia, observamos hipercrescimento nos fêmures fraturados comparados com o lado contralateral, nos animais em que o periósteo manteve-se íntegro após a fratura.

Estudo histoquímico e ultra-estrutural do sistema elástico da gengiva humana / Histochemical and ultrastructural study of the elastic fibers system of the human gingiva

No presente trabalho, as fibras do sistema elástico do conjuntivo da lâmina própria da gengiva humana foram estudadas aos microscópios óptico e eletrônico. Fragmentos de gengiva humana foram obtidos através de material de necrópsias nas regiöes de gengiva propriamente dita (gengiva marginal e insetida) e mucosa alveolar dos primeiros pré-molares superiores no sentido longitudinal em seis cadáveres, que foram processados e corados com técnicas para o estudo das fibras do sistema elástico no microscópio óptico. Para estudos ultra-estruturais, fragmentos de gengiva humana foram seccionados em três porçöes os quais foram fixados em glutaraldeído e ácido tânico e processados para exame ao microscópio eletrônico

Contribuiçäo ao estudo da distribuiçäo das fibras do sistema elástico em cicatrizes queloidianas / Elastic system fibers distribution in Keloidian scars

Fragmentos de tecido queloidiano foram estudados a nível de microscopia óptica e com o uso de técnicas gerais de coloraçäo, como hematoxilina-eosina e tricrômico de Gomori e de técnicas seletivas para revelar fibras do sistema elástico, tais como hematoxilina férrica e resorcina-fucsina, esta última precedida ou näo de oxidaçäo pela oxona. Vinte e seis fragmentos foram obtidos de 23 lesöes distintas. Quatro eram conseqüentes de foliculites, sete de acne, cinco de queimaduras, cinco de cirurgias e duas eram cicatrizes "espontâneas". Foi identificada em 24 fragmentos a presença de fibras oxitalânicas distribuídas difusamente e em quantidade variável por toda a área da lesäo examinada